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產(chǎn)品名稱:海藻糖含量檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC0330

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:海藻糖含量檢測試劑盒
測定方法采用蒽酮比色法。具有簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點。但是蒽酮比色法也存在一定缺陷,如果樣本中含有可溶性糖,則會影響測定。本試劑盒建議用于除海藻糖外不含其他可溶性糖樣本的測定。

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BC0330海藻糖含量檢測試劑盒的詳細資料:

 

產(chǎn)品名稱: 海藻糖含量檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Trehalose Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號:BC0330          產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣        產(chǎn)品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價格:420
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:    海藻糖檢測試劑盒| 海藻糖含量檢測試劑盒| 海藻糖|試劑盒

簡要介紹:
海藻糖存在于大量有機體中,包括細菌、藻類、酵母、植物、昆蟲和其他無脊椎動物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護生物體細胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存;
標準品:粉劑×1支,含10mg海藻糖。
產(chǎn)品說明
海藻糖存在于大量有機體中,包括細菌、藻類、酵母、植物、昆蟲和其他無脊椎動物。由于海藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護生物體細胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。
測定方法采用蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點。但是蒽酮比色法也存在一定缺陷,如果樣本中含有可溶性糖,則會影響測定。本試劑盒建議用于除海藻糖外不含其他可溶性糖樣本的測定。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿﹑研缽、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟:
一、海藻糖提取:   

  1. 細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
  2. 組織的處理:稱取約0.1g樣本,常溫研碎,加入1mL提取液,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
  3. 血清(漿)的處理:吸取約100μL血清(漿),加入0.9mL提取液,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
  4. 標準品的處理:標準品用1mL雙蒸水溶解,溶液濃度為10mg/mL,稀釋到0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/mL。

二、測定操作表:

  1. 分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長620nm,蒸餾水調(diào)零。
  2. 調(diào)節(jié)水浴鍋95度。
  3. 工作液的配制:臨用前在每瓶試劑一中加入16mL蒸餾水后,緩慢加入64mL濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用。用不完的試劑4℃保存一周。
  4. 標準曲線的建立:取0.25mL標準液和1mL工作液EP管中,95度水浴10min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻室溫,取1mL比色皿中,在620nm處測吸光值A。根據(jù)標準樣本的濃度(y)和吸光度(x)建立標準曲線。
  5. 樣本測定:取0.25mL樣本和1mL工作液EP管中,95度水浴10min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻室溫,取1mL比色皿中,在620nm處測吸光值A。

注意:若吸光值大于1,請將樣本用提取液稀釋后再測定,計算公式中乘以相應的稀釋倍數(shù)。
三、海藻糖含量計算:

  1. 根據(jù)標準曲線計算樣本中海藻糖的含量y(mg/mL)。
  2. 按樣本鮮重計算:

海藻糖含量(mg/g 鮮重)= V1×y÷(W×V1÷V2)=y ÷W。

  1. 按樣本蛋白濃度計算:

海藻糖含量(mg/mg prot)=V1×y÷(V1×Cpr)=y÷Cpr。

  1. 按細菌或細胞數(shù)量計算:

海藻糖含量(μg/104 cell)=1000 × V1 × y)÷(500 × V1÷V2)=2× y

  1. 血清(漿)體積含量計算

海藻糖含量(mg/mL)=(V1×y)÷(V3×V1÷V2)=10×y
1000:1mg/mL=1000μg/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,0.25 mL;V2:提取液總體積,1mL;V3:加入血清(漿)體積,0.1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

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