產品名稱:多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測試劑盒
產品型號:BC2660
產品特點:多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測試劑盒測定意義:多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細胞壁結合蛋白,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細胞壁結構解體,導致果實軟化,與果實成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細胞伸展發(fā)育以及木質化有關,在植物抗病性和食品貯藏保鮮領域具有較高的研究價值。
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多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測試劑盒
多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號: BC2660
規(guī)格:50T/24S
產品簡介:
多聚半乳糖醛酸酶(Ploygalacturonase, PG)屬果膠酶的一種,廣泛存在于植物、細菌及真菌中。其催化多聚半乳糖醛酸分解,在果實軟化、花粉授粉、種子發(fā)育成熟及器官脫落等方面具有重要作用,并且病原菌在侵染宿主植物時,可分泌多聚半乳糖醛酸酶來降解宿主細胞壁,進而導致病程發(fā)展。
PG 解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸,半乳糖醛酸與 DNS 試劑反應生成在 540 nm 有特征吸收峰的棕紅色物質,測定 540 nm 處吸光值變化可計算得果膠酶活性。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、低溫臺式離心機、水浴鍋、1 mL 玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
產品內容:
提取液:液體 30 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 8 mL×1 瓶,4℃保存。若溶液中有晶體析出,37℃水浴溶解。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 8 mL 蒸餾水,60℃水浴助溶。
試劑三:液體 20 mL×1 瓶,4℃避光保存。
標準品:粉劑×1 支,10 mg 半乳糖醛酸,4℃保存。臨用前加入 0.943 mL 蒸餾水,配成 50 μmol/mL的標準液。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
組織:按照質量(g): 蒸餾水體積(mL)為 1 : 5~10 的比例(建議稱取約 0.1 g,加入 1 mL 提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,16000 g,離心 10 min,取上清置于冰上待測。
細菌:先收集細菌到離心管內,離心后棄上清;按照細菌數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000︰1 的比例(建議 500 萬個細菌加入 1 mL 提取液),冰浴超聲波破碎細菌(功率 20%或 200 W,超聲 3 s,間隔 7 s,總時間 5 min);然后 4℃,16000 g,離心 10 min 取上清置于冰上待測。
液體:直接檢測或用提取液稀釋后檢測。
二、測定步驟:
1、 分光光度計預熱 30 min 以上,調節(jié)波長 540 nm,蒸餾水調零。
2、 將 50 μmol/mL 標準液稀釋為 10、6、4、3、2、1.5、1.2 μmol/mL 的標準溶液備用。
3、 操作表:(在 1.5mL 離心管中)
相關文獻:
《Functional analysis of the exocyst subunit BcExo70 in Botrytis cinerea》 作者:Wenqing GuanJuan FengRongxia WangZhiwei MaWeixia WangEmail authorKun WangEmail authorTingheng Zhu 期刊:Current Genetics 影響因子:3.464 PMID:31183512
多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測試劑盒
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